做好一个标准化PCR负压实验室——把控四大问题

　　一、PCR负压实验室核心问题——污染控制

　　PCR负压实验室布局分为污染区、半污染区、清理区三个区域。一般按照卫生部的要求，做好设计布局的原则，做到每个实验区独立，实验区方向单一，严格控制交叉污染。这也是PCR负压实验室的核心问题。

　　二、PCR负压实验室质量问题——建材挑选

　　从以上污染控制的核心问题来看，PCR负压实验室建筑材料一定要挑选易清洗、易消毒、不易积尘的材料。PCR负压实验室墙壁、天花板和地板应平整，不透水，耐化学品和消毒剂腐蚀。地板可以用PVC或者环氧地坪漆，防腐防滑，不允许铺地毯。

　　三、PCR负压实验室功能区问题——功能区布局

　　PCR负压实验室一般分为试剂制备区、标本制备区、扩增反应一区、纯化区、扩增反应二区和纯化后区。制备区和实验所需试剂的制备和包装通过转运窗口运送到制备区，严格遵守人员通道。准备区，主要是样品的保存，rnadna的提取和保存，rnadna加入扩增反应管，RNA DNA合成的测定。扩增区，dna扩增，加入制备的dna模板和合成的cDNA制备的反应混合物和主板反应混合物也可以在扩增区进行。在巢式pcr测量中，一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增具有较高的污染危害，第二次加样必须在该区域完成。扩增主要用于扩增产物的测定。该区域是扩增产物的主要污染源，需要避免通过该区域的物品或工作服带出扩增产物。

　　四、PCR负压实验室气流压力问题——通风系统

　　针对PCR负压实验室气流压力问题，虽然对PCR负压实验室没有严格的净化要求，但交叉污染是实验室的核心问题。因此，为避免各实验区交叉污染的可能，一般采用全送风全排风的气流组织，严格控制送排风比例，保证实验区内的压力。对试剂储存和制备区的气流压力控制没有严格要求。扩增反应混合物的制备和扩增区域中的压力梯度相对于相邻区域是负压。为了减少气溶胶造成的污染，有必要尽量减少这一地区的步行。扩增产物分析区是扩增产物污染的主要来源，因此该区域的压力梯度将调整为负压，以避免污染物的扩散。